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wufei123 发布于 2023-12-01 阅读(491)

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补充《医学实验基本操作技能》操作考试复习题找了好多地方,都没有找到合适点的总结,然后帮大家找到了这份资料,重点关注蛋白的吸光度,即测蛋白浓度,染色方法,氨基酸的测定及吸光度,染色方法等大家也可以网上再找找,实验技能笔试考的细,或许是我们没有得到有效情报不知道要考实验技能而没有复习的原故,觉得很难。

Ps:整个复试流程以及怎么提高复试成功率我们基本上都给大家总结完毕,接下来就看你们的表现了!最近实验进展较忙,可能不能及时给你们答疑解惑以及19的学弟学妹们更新考研班资料,但空闲时候一定会回复你们好好准备吧,我们没有前人探路,一路边走边探都过来了,所以,你们有什么理由不努力呢?。

                           By-南医大小喵                            附:对应习题在文末的链接里,大家尽快保存,避免被和谐《医学实验基本操作技能》操作考试复习题。

第二篇  医学实验基本操作技能第四章  显微形态实验基本操作技能第一节  显微镜的构造和使用1.指示并说出OLYMPUS CH-20显微镜的基本结构OLYMPUS CH-20普通生物显微镜的基本结构可分为三部分:。

第一部分是光学部分,包括物镜、目镜、镜筒等物镜:×4、×10为低倍物镜,×40为高倍物镜,×100为油镜目镜:10×目镜 第二部分是照明部分,包括光源和集光器光源:包括电源开关、灯泡、灯泡亮度调节旋扭集光器:包括聚光镜、光栅(也称光圈)、滤光片。

第三部分是机械部分,包括物镜转换器、粗、细调焦旋扭、载物台、通光孔、持片器、标本推动器、聚光镜升降旋纽、镜臂和镜座2.以OLYMPUS CH-20为例演示并说明普通生物显微镜的使用方法 (1)正确的移动、放置显微镜,规范的观察姿势:显微镜置于观察者的正前方,距离实验台边缘约5厘米,右侧放记录本或绘图纸等。

(2)开机:确认电源插头与显微镜接合牢固、显微镜电源开关在关闭位置和光亮度调节旋纽在最小位置,然后才能打开电源开关,调节光亮度调节旋纽至中等位置(3)调光:旋转物镜旋转器使低倍物镜(4倍)对准通光孔,升起聚光镜至载物台平面,打开光栅(也称光圈)至最大,使光量充足。

(4)放置切片:切片正面朝上放置于载物台上,用持片器卡住玻片右手调节载物台移动旋纽,使被观察组织对准通光孔(5)低倍镜观察:眼睛置于侧面,调节粗调焦旋纽,升起载物台至最高(OLYMPUS CH-20有自动保护功能)。

然后眼睛置于目镜上,调节粗调焦旋纽,使载物台缓慢下降,看到组织后,再调节细调焦旋纽,直至观察到清晰的组织图象然后测览整张切片(6)调节目距:双眼置于目镜上,推动目镜镜筒上的目距调节推杆左右移动,使目距与瞳距一致,即双眼视野重叠为一个清晰视野。

(7)高倍镜观察:低倍镜下将需要放大观察的部分移入视野中央,旋转物镜转换器,使高倍物镜对准通光孔,只需稍稍旋动细调焦旋纽,就能得到清楚的物像了(8)调节双眼屈光度(双眼清晰):使用高倍物镜(40倍),仅睁开右眼,调节细调焦旋纽至右眼视野清晰,然后闭上右眼,仅睁开左眼,调节左目镜上的屈光度补偿旋纽至左眼视野清晰,此时双眼清晰。

(9)正确擦拭显微镜和切片:干的擦镜纸可用于擦拭目镜、物镜、切片和光源上的灰尘;滴加擦镜液(乙醚液)的擦镜纸仅用于擦拭物镜镜头、切片上的油污(10)更换切片:在观察完一张切片后,将高倍镜转换至低倍镜后,再更换切片,以免损坏切片和镜头。

(11)关闭显微镜:依次降低载物台,低倍物镜对准通光孔,取下组织切片,调节光亮度致最小,关闭开关,拔下电源插头,将镜体各部擦拭干净,盘好电源线,罩上防尘罩3.以OLYMPUS CH-20为例说明显微镜的低倍镜(10倍镜)的使用方法。

(1)显微镜置于观察者的正前方,距离实验台边缘约5厘米(2)开机:确认电源插头与显微镜接合牢固、显微镜电源开关在关闭位置和光亮度调节旋纽在最小位置,然后才能打开电源开关,调节光亮度调节旋纽至中等位置(3)调光:旋转物镜旋转器使低倍物镜(4倍镜)对准通光孔,升起聚光镜至载物台平面,打开光栅(也称光圈)至最大,使光量充足。

(4)放置切片:切片正面朝上放置于载物台上,用持片器卡住玻片右手调节载物台移动旋纽,使被观察组织对准通光孔(5)低倍镜(4倍镜)观察:眼睛置于侧面,调节粗调焦旋纽,升起载物台至最高然后眼睛置于目镜上,调节粗调焦旋纽,使载物台缓慢下降,看到组织后,再调节细调焦旋纽,直至观察到清晰的组织图象。

(6)调节目距:双眼置于目镜上,推动目镜镜筒上的目距调节推杆左右移动,使目距与瞳距一致,即双眼视野重叠为一个清晰视野(7)低倍镜(10倍镜)观察:旋转物镜转换器,使10倍物镜对准通光孔,只需稍稍旋动细调焦旋纽,就能得到清楚的物像了。

然后测览整张切片4.以OLYMPUS CH-20为例说明显微镜的高倍镜(40倍镜)的使用方法 (1)放置切片:切片正面朝上放置于载物台上,用持片器卡住玻片右手调节载物台移动旋纽,使被观察组织对准通光孔(2)低倍镜(10倍镜)观察:眼睛置于侧面,调节粗调焦旋纽,升起载物台至最高。

然后眼睛置于目镜上,调节粗调焦旋纽,使载物台缓慢下降,看到组织后,再调节细调焦旋纽,直至观察到清晰的组织图象    (3)高倍镜(40倍镜)观察:旋转物镜转换器,使高倍物镜(40倍镜)对准通光孔,只需稍稍旋动细调焦旋纽,就能得到清楚的物像了。

(注意:低倍镜观察清晰后,转换高倍镜观察时,不要降低载物台,只需稍稍旋动细调焦旋纽,就能得到清楚的物像了)5.以OLYMPUS CH-20为例简述普通生物显微镜的开机和关机步骤普通生物显微镜的开机步骤是:检查电源线接口是否连接牢固,确认显微镜电源开关在关闭位置(O),并且光亮度调节旋纽在最小位置(1)。

然后才能打开电源开关(I),调节光亮度调节旋纽至中等位置(2-3)普通生物显微镜的关机步骤是:依次降低载物台,低倍物镜对准通光孔,取下组织切片,调节光亮度致最小,关闭开关,拔下电源插头,将镜体各部擦拭干净,盘好电源线,罩上防尘罩,将显微镜置于桌子中央。

6.以OLYMPUS CH-20为例简述如何调节显微镜的双眼屈光度同步(双眼清晰)?(1)放置切片:切片正面朝上放置于载物台上,用持片器卡住玻片右手调节载物台移动旋纽,使被观察组织对准通光孔(2)低倍镜(10倍镜)观察:眼睛置于侧面,调节粗调焦旋纽,升起载物台至最高。

然后眼睛置于目镜上,调节粗调焦旋纽,使载物台缓慢下降,看到组织后,再调节细调焦旋纽,直至观察到清晰的组织图象    (3)高倍镜(40倍镜)观察:旋转物镜转换器,使高倍物镜(40倍镜)对准通光孔,只需稍稍旋动细调焦旋纽,就能得到清楚的物像了。

(4)调节双眼屈光度同步:使用高倍物镜(40倍),仅睁开右眼,调节细调焦旋纽至右眼视野清晰;然后闭上右眼,仅睁开左眼,调节左目镜上的屈光度补偿旋纽至左眼视野清晰,此时双眼清晰7.演示并说明如何正确擦拭显微镜和切片?。

干擦镜纸:可用于擦拭目镜、物镜、切片和光源上的灰尘等,取2-3张擦镜纸,轻轻擦拭镜头或切片上的灰尘将用过的擦镜纸置于污物桶内湿擦镜纸:即滴加了擦镜液(乙醚液或二甲苯液)的擦镜纸,仅用于擦拭物镜镜头、切片上的油污。

旋转物镜转换器,将污染的物镜转出,取2-3张擦镜纸,滴加1-2滴擦镜液(乙醚液或二甲苯液),轻轻按在物镜镜头上,等待1-2秒钟,然后稍微转动擦镜纸,拭净油污将用过的擦镜纸置于污物桶内第二节  制片和染色技术

1.外周血涂片制作和瑞特染色的操作步骤 (1)采血:75%乙醇消毒手指,用采血针迅速刺破手指皮肤,第一滴血擦去不要(2)推片:将流出的第二滴血滴在玻片右端取另一玻片置于血滴左线,稍向后退,血液就充满在两玻片的斜角中,再以30~40°角向左方均匀推出,即涂成血液薄膜。

(3)染色:待涂片干燥后,在欲染色的区域,用特种铅笔画一圆框,加数滴瑞特染液在血膜上,染色3~5分钟,然后滴加等量蒸馏水静置4~6分钟后,用蒸馏水将多余染液慢慢冲去,即可观察(4)封片:涂片完全干燥后,可用中性树胶或浓香柏油封片,长期保存。

2.显微镜观察并用指针指示出血涂片中的中性粒细胞(1)放置切片:血涂片正面朝上放置于载物台上,用持片器卡住玻片右手调节载物台移动旋纽,使被观察组织对准通光孔(2)低倍镜观察:眼睛置于侧面,调节粗调焦旋纽,升起载物台至最高。

然后眼睛置于目镜上,调节粗调焦旋纽,使载物台缓慢下降,看到血细胞后,再调节细调焦旋纽,直至观察到清晰的细胞图象(3)高倍镜观察:旋转物镜转换器,使高倍物镜(40倍镜)对准通光孔,只需稍稍旋动细调焦旋纽,就能得到清楚的物像了。

(4)中性粒细胞大小适中,核常分为2-5叶,细胞越成熟叶数越多,胞浆较丰富,嗜酸性染色,呈淡红色(5)调节载物台移动旋纽,将找到的中性粒细胞移动到镜下视野的中央,并用指针的尖端正对着找到的中性粒细胞即可。

11.显微镜观察并用指针指示出血涂片中的淋巴细胞(1)放置切片:血涂片正面朝上放置于载物台上,用持片器卡住玻片右手调节载物台移动旋纽,使被观察组织对准通光孔(2)低倍镜观察:眼睛置于侧面,调节粗调焦旋纽,升起载物台至最高。

然后眼睛置于目镜上,调节粗调焦旋纽,使载物台缓慢下降,看到血细胞后,再调节细调焦旋纽,直至观察到清晰的细胞图象(3)高倍镜观察:旋转物镜转换器,使高倍物镜(40倍镜)对准通光孔,只需稍稍旋动细调焦旋纽,就能得到清楚的物像了。

(4)淋巴细胞体积较小,核大而略呈球形,染色质致密结块,呈深紫色,一侧可有缺痕;胞浆稀少,呈环状,嗜碱性染色,呈天蓝色(5)调节载物台移动旋纽,将找到的淋巴细胞移动到镜下视野的中央,并用指针的尖端正对着找到的淋巴细胞即可。

第五节  血液及相关指标检测1.演示并说明ABO血型鉴定(玻片法)的基本步骤(1)取A型标准血清和B型标准血清各一滴,分别滴在验血片两端,标明A和B(2)用75%的乙醇棉球消毒耳垂或指尖,用消毒采血针刺破皮肤,取1~2滴血于盛有lml生理盐水之小试管中,混匀制成红细胞悬液。

(3)用滴管吸取红细胞悬液,分别滴一滴于验血片两端之血清上,用小玻棒混匀(注意勿将两种血清接触)(4)轻轻摇动玻片,使血液与血清充分混合,10min后先用肉眼观察有无凝集反应,再用显微镜在低倍镜下观察,如无凝集现象,再用小玻棒混合之,30min后,再行上述观察。

(5)根据凝集情况判定被检查者血型2.演示并说明外周血红细胞计数——显微镜计数法的操作步骤(1)制备红细胞稀释液:以75%乙醇擦洗消毒手指,用采血针迅速刺破皮肤,擦去第一滴血不用用吸血管准确吸血10μl,吹入装有2ml生理盐水的试管中,混匀。

(2)加样:将细胞计数板上的盖玻片盖好(注意盖玻片的位置应适当),然后用移液器吸取10μl红细胞稀释液加入到细胞计数板的盖玻片旁,使红细胞稀释液自动充满细胞计数池,切勿有气泡(3)计数:静置2分钟,待细胞下沉。

用低倍镜(10倍物镜)找到方格线计算中央大格内四角和中心五个中格内的全部红细胞数3.演示并说明外周血白细胞计数——显微镜计数法的操作步骤(1)制备白细胞稀释液:用抗凝采血管在经酒精消毒过的上臂正中静脉采血1-2ml,立即颠倒混匀;然后用移液器移取抗凝血200μl加入盛有4ml稀释液(80μl冰醋酸加入4ml蒸馏水中)的试管中,颠倒混匀。

(2)加样:将细胞计数板上的盖玻片盖好(注意盖玻片的位置应适当),然后用移液器吸取10μl白细胞稀释液加入到细胞计数板的盖玻片旁,使白细胞稀释液自动充满细胞计数池,切勿有气泡(3)计数:静置2分钟,待细胞下沉。

用低倍镜(10倍物镜)找到方格线计算四角4个大方格内的全部白细胞数 第五章  医学机能实验基本操作技能第一节  实验动物的基本操作方法实验一、动物实验的基本操作方法1(实验动物的捉拿、固定、性别鉴别、标记、给药方法、处死方法)

1.演示小鼠的捉拿固定小白鼠比大白鼠性格温和,一般毋需戴手套捕捉,但也要提防被咬伤捉拿时先用右手抓住鼠尾轻轻提起,置于鼠笼或实验台上(请勿悬空,防止其回头咬伤),在其向前爬行中,用左手的拇指、食指和中指抓住小鼠两耳后颈背部皮肤,然后将鼠体翻转向上固定在左手掌心中,拉直后肢,以无名指及小指夹住鼠尾部即可。

2.演示大鼠的捉拿固定大白鼠牙齿锋利,容易激怒咬人,捉拿时左手应戴防护手套,先用右手抓住尾巴,放在粗糙面上(如置于鼠笼),左手拇指和食指捏住两耳及前颈部皮肤,其余手指与手掌握住背部和腹部不要用力过大,切忌捏其颈部,以免窒息致死,过松容易挣脱而被咬伤。

3.鉴别小鼠性别,并灌胃小白鼠的性别鉴定方法,主要是通过观察动物的肛门与生殖器之间的距离来判断,距离远的为雄鼠,距离近的为雌鼠另外雌鼠体表在性器官部位有阴道口,而且在腹部有5对比较明显的乳头,在气温高时,大白鼠和家兔一样,雄鼠的阴囊部位也有两个椭圆形的睾丸,可以帮助鉴别。

此外,动物的外观也可以帮助区分其性别,通常在同龄鼠中雄鼠的身体外形比雌鼠要大,躯干及背部的肌发育比较强壮,雄鼠的头较大而且灵活,而雌鼠腰部及臀部发育较为宽大,并且腹部明显比雄鼠大用左手捉持固定小白鼠,使头部向上,颈部拉直但不宜过紧,以免窒息,右手持灌胃器,先从小白鼠口角插人口腔,压其头部,使口腔和食管成一直线,再紧沿上腭及咽后壁慢慢插入食管,使其前端到达膈肌位置。

如灌胃器插入2~3cm很顺利,动物安静,呼吸平稳,表明已经插人食管,即可将药液注入,如插入有阻力或动物有强烈挣扎,必须拔出重插,以免损伤食管或误入气管导致死亡4.叙述小鼠灌胃的方法,并具体操作一下用左手捉持固定小白鼠,使头部向上,颈部拉直但不宜过紧,以免窒息,右手持灌胃器,先从小白鼠口角插人口腔,压其头部,使口腔和食管成一直线,再紧沿上腭及咽后壁慢慢插入食管,使其前端到达膈肌位置。

如灌胃器插入2~3cm很顺利,动物安静,呼吸平稳,表明已经插人食管,即可将药液注入,如插入有阻力或动物有强烈挣扎,必须拔出重插,以免损伤食管或误入气管导致死亡灌胃量一般为0.1~0.3ml/10g5.动物处死的方法有哪些?小鼠最常用处死方法为哪一种?请演示一下。

常驻用动物的处死方法有,颈椎脱臼法、断头法、击打法、急性失血法、化学致死法小鼠常驻用的处死方法是:颈椎脱臼法、击打法(1)颈椎脱臼法:用手抓住鼠尾用力向后拉,同时另一手拇指和食指用力向下按住鼠头部使其脊髓和延髓离断,鼠可立即死亡。

    (2)断头法:用剪刀在鼠颈部将鼠头剪掉断头时实验者可戴上棉纱手套,用右手握住鼠头部,左手握住背部,露出颈部,助手用剪刀在鼠颈部将鼠头部剪掉鼠由于剪断了脑脊髓,同时大量出血,很快死亡(3)击打法:右手抓住鼠尾部提起,用力击打其头部,鼠发生痉挛后很快死亡。

也可用小木锤用力击打鼠头部致死   (4)急性失血法:可采用眼眶动脉和静脉急性大量失血法使鼠很快死亡(5)化学致死法:吸入CO,大白鼠和小白鼠在CO浓度为0.2%~0.5%的环境中即可中毒死亡皮下注射士的宁(小鼠用量为0.76mg~2.0mg/kg,大白鼠为3.0mg~3.5mg/kg)、吸入乙醚、氯仿均可致死。

大白鼠也可用25%氯化钾溶液0.6 ml静脉注射致死6.请指出下列给药方式是何种给药方式,im说明操作要点,并操作是肌内注射;部位:肌内注射一般选肌肉发达,无大血管通过的部位大白鼠、小白鼠可注射大腿内侧或外侧肌肉。

注射前应检查肌肉厚度,以便控制注射深度注射时针头迅速刺入肌肉,回抽注射器针栓如无回血现象,即可注射7.请指出下列给药方式是何种给药方式,ip说明操作要点,并操作ip是腹腔注射;给小白鼠、大白鼠进行腹腔注射时,以左手固定动物,使腹部向上,为避免伤及内脏,应尽量将动物头处于低位,使脏器移向横膈处,右手持注射器从下腹左或右侧向头部方向刺入皮下,针尖稍向前进针3~5mm,再将注射器沿45°角斜向穿过腹肌进入腹腔,此时有落空感,回抽无血液、尿液、肠液,即可注入药液。

注意针头不要刺入过深,进针部位不要太靠上腹,以免刺破内脏剂量:小白鼠注射量为0.1~0.2ml/10g,最大不超过0.5ml/只,大白鼠注射量为1.5ml/只8.请指出下列给药方式是何种给药方式,iv说明操作要点,并操作。

iv是静脉注射;小白鼠和大白鼠:一般采用尾静脉注射鼠尾静脉有三根,左右两侧及背侧各一根操作时先将鼠置于特制的固定筒内(或将鼠放在鼠笼内,把鼠尾从鼠笼网眼中拉出),使鼠尾外露,用75%酒精或二甲苯棉球涂擦,或置入40℃~50℃温水中浸泡片刻,使尾部血管扩张。

以左手拇指和食指捏住鼠尾两侧,使静脉充盈,用中指从下面托住鼠尾,以无名指和小指夹住鼠尾的末梢,右手持注射器(4~4号针头),使针头与尾部近似平行刺入尾静脉,将针头刺人血管(即针头与尾部约3°~5°夹角),缓慢给药。

若针头已扎入血管则针栓很易推动,且尾部皮肤不肿胀,不冒水滴,静脉呈一条白线若推注有阻力而且局部变白,说明针头不在血管内,应拔针重新刺入穿刺时宜从近尾尖部1/3处静脉开始,以便重复向尾根部移位注射注射后把尾部向注射侧弯曲,或拔针后随即以干棉球按压止血。

大鼠舌下静脉粗大,也可采用舌下静脉给药注射时,先麻醉好动物,再拉出舌头,找到舌下静脉,直接注入药物小白鼠一般用药量为0.1~0.2ml/10g,不宜超过0.5ml/10g大白鼠一般用药量<1ml/只9.请指出下列给药方式是何种给药方式,sc。

说明操作要点,并操作sc是皮下注射;部位:皮下注射一般选取皮下组织疏松的部位,大白鼠、小白鼠可在颈后肩胛间、腹部两侧做皮下注射或左手抓住并提起头部皮肤,右手持注射器,自头顶部水平插入皮下,注入药液方法:皮下注射时用左手拇指和食指轻轻提起动物颈背皮肤,右手持注射器,使针头水平刺入皮下,若针头容易摆动,证明针头已在皮下,推送药液使注射部位隆起。

拔针时,以手指轻按针孔片刻,可防止药液外漏若两人合作,一人左手抓住小白鼠头部皮肤,右手拉住鼠尾,另一人左手提起背部皮肤,右手持注射器刺入剂量:小白鼠注射量为0.1~0.3ml/10g,大白鼠注射量<1ml/只。

10.请指出下列给药方式是何种给药方式,ig说明操作要点,并操作ig请指出下列给药方式是何种给药方式,ig说明操作要点,并操作是灌胃给药;用左手捉持固定小白鼠,使头部向上,颈部拉直但不宜过紧,以免窒息,右手持灌胃器,先从小白鼠口角插人口腔,压其头部,使口腔和食管成一直线,再紧沿上腭及咽后壁慢慢插入食管,使其前端到达膈肌位置。

如灌胃器插入2~3cm很顺利,动物安静,呼吸平稳,表明已经插人食管,即可将药液注入,如插入有阻力或动物有强烈挣扎,必须拔出重插,以免损伤食管或误入气管导致死亡小鼠灌胃量一般为0.1~0.3ml/10g,大鼠灌胃量一般为1~2ml/100g。

11.大鼠静脉给药的途径有哪些?请演示一下大鼠静脉给药的途径有哪些?请演示一下一般采用尾静脉注射鼠尾静脉有三根,左右两侧及背侧各一根操作时先将鼠置于特制的固定筒内(或将鼠放在鼠笼内,把鼠尾从鼠笼网眼中拉出),使鼠尾外露,用75%酒精或二甲苯棉球涂擦,或置入40℃~50℃温水中浸泡片刻,使尾部血管扩张。

以左手拇指和食指捏住鼠尾两侧,使静脉充盈,用中指从下面托住鼠尾,以无名指和小指夹住鼠尾的末梢,右手持注射器(4~4号针头),使针头与尾部近似平行刺入尾静脉,将针头刺人血管(即针头与尾部约3°~5°夹角),缓慢给药。

若针头已扎入血管则针栓很易推动,且尾部皮肤不肿胀,不冒水滴,静脉呈一条白线若推注有阻力而且局部变白,说明针头不在血管内,应拔针重新刺入穿刺时宜从近尾尖部1/3处静脉开始,以便重复向尾根部移位注射注射后把尾部向注射侧弯曲,或拔针后随即以干棉球按压止血。

大鼠舌下静脉粗大,也可采用舌下静脉给药注射时,先麻醉好动物,再拉出舌头,找到舌下静脉,直接注入药物实验二、动物实验的基本操作方2(麻醉、实验标本的采集方法、处死、尸检)1.小鼠解剖后,辨别心、肝、脾、肺、肾等器官。

心肺在膈肌以上胸腔;而肝脏在膈肌下沿靠上腹部右侧;脾脏紧贴胃大弯处紧贴胃;肾脏在中腹部脊柱两侧2.辨别小鼠肾甲状腺、肾上腺、胰腺甲状腺在喉头下方紧贴气管呈半园形;肾上腺在肾脏的上方,和大米大小类同;胰腺在十二指肠周围和肠系膜类同。

3.大鼠解剖,辨别心、肝、脾、肺、肾心肺在膈肌以上胸腔;而肝脏在膈肌下沿靠上腹部右侧;脾脏紧贴胃大弯处紧贴胃;肾脏在中腹部脊柱两侧4.演示小鼠的剪尾取血法(口述要点)将清醒鼠放在鼠笼中,露出尾巴,用酒精涂擦或用45℃温水浸泡使血管扩张,剪去尾尖0.3~0.5 cm后,尾静脉血即可流出,用手轻轻地从尾根部向尾尖挤捏,可取到一定量的血液。

5.演示小鼠的眼球后静脉丛取血法左手持鼠,拇指与中指抓住颈部皮肤,食指按压头部向下,阻滞静脉回流,使眼球后静脉丛充血,眼球外突右手持1%肝素溶液浸泡过的自制吸血器,使采血器与鼠面成45°夹角从内眦部刺入,沿内下眼眶壁,向眼球后推进4~5 mm,旋转吸血针头,切开静脉丛,血液自动进入吸血针筒,轻轻抽吸血管(防止负压压迫静脉丛使抽血更困难),拔出吸血针,放松手压力,出血可自然停止。

也可用特制的玻璃取血管(管长7~10cm,前端拉成毛细管,内径0.1~1.5 mm,长为1 cm,后端管径为0.6cm)必要时可在同一穿刺孔重复取血此法也适用豚鼠和家兔6.演示小鼠的断头取血法实验者带上手套,用左手抓紧鼠颈部位,右手持剪刀,从鼠颈部剪掉鼠头,迅速将鼠颈端向下,对准有抗凝剂的试管,收集从颈部流出的血液,小鼠可取血0.8~1.2ml。

  7.演示大鼠的鼠尾刺血法大白鼠用血量不多时(仅作白细胞计数或血红蛋白检查)可采用本法先将鼠尾用温水擦拭,再用酒精消毒和擦拭,使鼠尾充血,用7号或8号注射针头,刺入鼠尾静脉,拔出针头即有血液滴出如果长期反复取血,应先靠近鼠尾末端穿刺,以后再逐渐向近心端穿刺。

8.演示小鼠的眼眶取血法(摘眼球取血)演示小鼠的眼眶取血法(摘眼球取血)左手持鼠,拇指与食指捏紧头颈部皮肤,使鼠眼球突出,右手持弯镊或止血钳,钳夹一侧眼球部,将眼球摘出,鼠倒置,头部向下,此时眼眶很快流血,将血滴入预先加有抗凝剂的玻璃管内,直至流血停止。

此法由于取血过程中动物未死,心脏不断跳动,一般可取鼠体重4%~5%的血液量,是一种较好的取血方法,但只适用一次性取血9.请对小鼠进行尸检,辨认以下胃、十二指肠、盲肠、胆囊、胆总管和胰脏属腹腔脏器检查:将处死后小鼠仰卧固定于解剖台上,沿正中线剪开皮肤和腹壁肌肉,剖开腹腔时,找出胃、十二指肠、盲肠、胆囊、胆总管和胰脏。

10.请对大鼠进行尸检,辨认以下胃、十二指肠、盲肠、胆总管和胰脏属腹腔脏器检查:将处死后小鼠仰卧固定于解剖台上,沿正中线剪开皮肤和腹壁肌肉,剖开腹腔时,找出胃、十二指肠、盲肠、胆总管和胰脏11.请辨认小鼠的性别,并解剖,找出卵巢和子宫。

属泌尿器官和生殖器,雌性小鼠在下腹部可将两侧卵巢、输孵管、子宫体一同取出并辨认12.请辨认大鼠的性别,并解剖,找出卵巢和子宫属泌尿器官和生殖器,雌性大鼠在下腹部可将两侧卵巢、输孵管、子宫体一同取出并辨认。

13.请对小鼠进行尸检,辨认肾、肾上腺、膀胱、胸腺在下腹部可找到膀胱;在胸腔可找到胸腺;在肾脏的上方,和小米大小类同是肾上腺;肾脏在中腹部脊柱两侧14.请对大鼠进行尸检,辨认肾、肾上腺、膀胱、胸腺在下腹部可找到膀胱;在胸腔可找到胸腺;在肾脏的上方,和大米大小类同是肾上腺;肾脏在中腹部脊柱两侧。

第二节  机能基本实验常用仪器及设备使用技术实验一、手术器械的基本操作技术1(常用手术器械的使用方法、手术的缝合及打结)1.辨认常用手术器械手术剪刀、粗剪刀、眼科剪刀、镊子、圆头镊、眼科镊、金属探针、玻璃分针、锌铜弓、蛙心夹、蛙板、培养皿、手术刀、持针器、止血钳、动脉夹、三通开关、血管插管、气管插管。

2.口述拆线方法要点并演示拆线是指拆除皮肤上的缝线埋在皮肤深部组织和脏器上的缝线不拆除,仅在切口内化脓时要将暴露在外面的缝线拆除拆线的时间一般需8天~12天腹下、四肢等张力较大的部位拆线时间应稍长根据试验情况,也有不拆线的。

特别对小动物手术许多情况下不拆线,线头可自动脱落拆线时,先将线结及周围皮肤消毒,然后用有齿镊提夹线结向上稍向对侧提拉,使埋在组织内的缝线外露一段,用尖剪刀尖伸向结内并剪断此处,拉出线结,不让外露缝线通过深部组织,防止细菌感染。

最后再用消毒剂擦缝线孔,需要保护的刀口也可盖上敷料保护,两天后可取掉3.演示正确的持止血钳方法及常用执刀方法正确持止血钳方法是用拇指和无名指分别套取两个环,中指配合无名指在环的外侧,食指放在剪刀柄的一侧。

常用持刀方式有四种:执弓式、执笔式、握持式和反挑式执弓式是最常用的一种执刀方式,使用灵活且动作范围广,适合各种腹部皮肤切口,腹直肌前鞘的切开等;执笔式用力轻柔,操作灵巧精细,适于切开短小切口,如血管、神经等;握持式适用于用力较大的切开;反挑式用于切断钳夹组织和修整切口。

4.演示各种手术器械正确拿法和操作持针器、手术剪、眼科镊、止血钳、镊子、手术刀;正确持持针器、手术剪、眼科镊、止血钳方法是用拇指和无名指分别套取两个环,中指配合无名指在环的一侧,食指放在剪刀柄的一侧而镊子的拿法是,用食指、中指和拇指分别捏取镊柄有齿部位。

手术刀的拿法执弓式、执笔式、握持式和反挑式5.演示单手打结法单手打结法:适用于各部位的打结,操作简便,速度快(1)方结:用于一般结扎止血和各种缝合的结扎结扎时两端均必须用力均匀,避免形成滑结(2)外科结:结扎第一道时,两线重复交叉两圈,第二道线亦如方结。

此种结因第一道结线绕两圈,磨擦面增大,不易松开常用于结扎大血管(3)三重结:用于重要组织和大血管的结扎在方结基础上再增加一道结扎6.演示止血钳打结法止血钳打结法:用于浅部缝合的结扎、深部狭小术野的结扎及某些精细手术的结扎。

7.演示褥式缝合法为两个相反方向而接连的间断缝合可使切口边缘外翻,有垂直及平行两种褥式缝合,常用于松弛部位皮肤的缝合或血管缝合8.演示间断缝合法间断缝合(结节缝合):将缝线穿过切口两侧边缘即行打结常用于皮肤、皮下组织、粘膜或筋膜的缝合。

9.演示荷包缝合法荷包缝合:即作环状的浆肌层连续缝合,常用于胃肠小的造口包埋使之内翻缝合实验二、BL-420(BL-410)生物机能实验系统使用1.呼吸换能器、压力换能器、张力换能器的辨认呼吸换能器、压力换能器、张力换能器可依据其各自的外形、结构特点和功能进行鉴别。

2.分时复用区包括几部分,如何实现其中各部分的切换?分时复用区包括:控制参数调节区、显示参数调节区、通用信息显示区和专用信息显示区四个分区,它们分时占用屏幕右边相同的一块显示区域,它们通过单击分时复用区顶部的切换按钮进行切换。

3.演示实验标题及实验人员的设置(1)实验标题的设置:“设置”菜单→“实验标题” →在弹出“设置实验标题”对话框中设置或者改变实验标题(2)实验人员的设置:“设置”菜单→“实验人员”→在弹出的“实验组及组员名单输入”对话框中输入实验人员的名字及组号。

4.试操作如何开始、暂停、停止实验(1)开始:首先需要双击Windows操作系统桌面上的“BL-420/BL-410生物机能实验系统”图标即可启动程序有两种常用方法可以启动生物信号采样与显示:第一种方法是: “输入信号”菜单→选择通道→设定信号种类→工具条 “启动波形显示”命令按钮;。

第二种方法是: “实验项目”菜单→选择实验项目(2)暂停:实验过程中可随时点击工具条“暂停”与“开始”按钮进行信息采样的暂停与继续(3)停止:点击工具条上的“停止”按钮→对话框“确实要停止实验吗” →选择“是”→给文件取名→点击“保存”按钮(默认保存在data文件夹)。

5.如何打开一个文件进行反演?选择工具条或“文件”菜单的“打开”命令(默认打开data文件夹)→双击保存过的文件(或单击保存过的文件→“打开”)→可以拖动滚动条来观察不同时间段的数据或通过窗口下方的滚动条和反演按钮窗口中的查找命令按钮查找所需要的数据,也可以选择工具条上的“开始”命令按钮,让反演数据象实时采样数据那样移动起来。

6.怎样进行实验结果的数据剪辑?(1)在整个反演数据中查找需要剪辑的实验波形;(2)在需要剪辑的实验波形左上角按下鼠标左键不放,向右下方拖动鼠标以进行区域选择,当选择好区域后松开鼠标左键即完成区域选择操作;

(3)按下工具条上的数据剪辑命令按钮,或者在选择的区域上单击鼠标右键弹出快捷菜单并且选择数据剪辑功能,就完成了一段波形的数据剪辑;(4)重复以上3步对不同波形段进行数据剪辑;(5)在停止反演时,一个以“cut.tme”命名的数据剪辑文件将自动生成,操作者可以为这个数据剪辑文件更改文件名。

7.怎样进行实验结果的图形剪辑?(1)在实时实验过程或数据反演中,按下“暂停”按钮使实验处于暂停状态,此时,工具条上的图形剪辑按钮处于激活状态,按下该按钮将使系统处于图形剪辑状态;(2)对感兴趣的一段波形进行区域选择,可以只选择一个

通道的图形或同时选择多个通道的图形;(3)当进行了区域选择以后,图形剪辑窗口出现,选择的图形将自动粘贴到图形剪辑窗口中;(4)选择图形剪辑窗口右边工具条上的退出按钮退出图形剪辑窗口;(5)重复步骤1、2、3、4剪辑其它波形段的图形,然后拼接成一幅整体图形,此时可以打印或存盘,也可把这张整体图形复制到其它应用程序,如Word、Excel中。

8.实验结果的剪辑实验结果的剪辑包括数据剪辑和图形剪辑两部分实验结果的数据剪辑:(1)在整个反演数据中查找需要剪辑的实验波形;(2)在需要剪辑的实验波形左上角按下鼠标左键不放,向右下方拖动鼠标以进行区域选择,当选择好区域后松开鼠标左键即完成区域选择操作;。

(3)按下工具条上的数据剪辑命令按钮,或者在选择的区域上单击鼠标右键弹出快捷菜单并且选择数据剪辑功能,就完成了一段波形的数据剪辑;(4)重复以上3步对不同波形段进行数据剪辑;(5)在停止反演时,一个以“cut.tme”命名的数据剪辑文件将自动生成,操作者可以为这个数据剪辑文件更改文件名。

实验结果的图形剪辑:(1)在实时实验过程或数据反演中,按下“暂停”按钮使实验处于暂停状态,此时,工具条上的图形剪辑按钮处于激活状态,按下该按钮将使系统处于图形剪辑状态;(2)对感兴趣的一段波形进行区域选择,可以只选择一个

通道的图形或同时选择多个通道的图形;(3)当进行了区域选择以后,图形剪辑窗口出现,选择的图形将自动粘贴到图形剪辑窗口中;(4)选择图形剪辑窗口右边工具条上的退出按钮退出图形剪辑窗口;(5)重复步骤1、2、3、4剪辑其它波形段的图形,然后拼接成一幅整体图形,此时可以打印或存盘,也可把这张整体图形复制到其它应用程序,如Word、Excel中。

9.如何进入图形剪辑窗口?进入图形剪辑窗口的方法有二:一是执行图形剪辑操作后自动进入;二是选择工具条上的“进入图形剪辑窗口”命令按钮或选择“窗口”菜单上的“图形剪辑窗口”命令10.如何清空整个图形剪辑页?。

点击图形剪辑工具条的“刷新”按钮将清空整个剪辑页,即将剪辑页上所有的图形全部擦掉,只留下一张空白的剪辑页11.如何在图形剪辑页中选择并移动一段图形?点击图形剪辑工具条的“选择并移动”按钮,在剪辑页中移动的鼠标将变为一个中空的十字,首先移动鼠标到需要选择区域的左上角,然后按下鼠标左键不放,移动鼠标选择区域的右下角,此时,有一个虚线方框随着鼠标的移动而移动,虚线方框代表选择的区域,当选择好区域以后松开鼠标左键即完成了图形剪辑页的区域选择。

如果将鼠标移动到这块剪辑区域上,鼠标将变为一只手的形状,表明可以移动这块选择的区域12.如何在图形剪辑页中添加文字?点击图形剪辑工具条的“写字”按钮,在剪辑页中移动的鼠标将变为一个中空的十字,使用与“选择并移动”命令相同的方法选择写字区域,松开鼠标左键将出现一个矩形的写字区域,有一个文本光标在写字区域内闪烁,它指定写字的位置,操作者只需在选定的写字区域内书写注释,书写完注释后,在剪辑页上写字区域以外的任何地方单击鼠标左键,将完成本次写字操作,写字区域消失。

13.控制参数调节区的使用在BL-420/BL-410软件主界面的最右边是一个分时复用区,在该区域内包含有控制参数调节区,点击按钮切换到控制参数调节区14.显示参数调节区的使用在BL-420/BL-410软件主界面的最右边是一个分时复用区,在该区域内包含有显示参数调节区,点击按钮切换到显示参数调节区。

15.前景色、背景色的调节前景色选择:在前景色文字的后面是一个前景色选择列表框,在列表框中显示的颜色块代表波形曲线当前正在使用的颜色,如果想改变波形曲线颜色,单击前景色列表框右边向下的箭头,这时会出现一个颜色列表供选择。

背景色选择:在背景色文字的后面是一个背景色选择列表框,在列表框中显示的颜色块代表该显示通道背景的当前使用颜色,改变背景颜色的方法与改变前景颜色的方法相同16.标尺格线色、标尺格线类型的调节标尺格线色选择:在标尺格线色文字的后面是一个标尺格线色选择列表框,在列表框中显示的颜色块代表该显示通道标尺格线的当前使用颜色,改变标尺格线颜色的方法与改变前景颜色的方法相同。

标尺格线类型选择:在标尺格线类型文字的后面是一个标尺格线类型选择列表框,这里有5种格线类型供选择,可以从中选择一种作为窗口背景中新的标尺格线类型在选择标尺格线的颜色和类型时应注意尽量使其不显眼,以免影响波形曲线的观察,因为标尺格线仅仅是波形时间和幅度的参照物,甚至可以不显示它。

17.添加通用实验标记在工具条点击“通用标记”按钮→箭头的前面有一个顺序标记的数字,比如1、2、3等,箭头的后方显示添加标记的绝对时间18.添加特殊实验标记从“实验标记项”列表框选择一个特殊标记→指定的波形位置旁单击鼠标左键→若想添加另一个特殊实验标记需要在 “实验标记项”列表框中再做一次选择。

19.特殊实验标记组的编辑过程中,如何添加一个实验标记组?特殊实验标记组的添加:点击特殊实验标记选择区编辑框按钮“L”(位于BL-420主界面的右上角、BL-410主界面的右下角)→点击“实验标记组编辑区”中的“添加”→输入实验标记组名→点击“修改”。

20.特殊实验标记组的编辑过程中,如何修改一个实验标记组?点击特殊实验标记选择区编辑框按钮“L”(位于BL-420主界面的右上角、BL-410主界面的右下角)→选中“实验标记组列表”的组名→输入新实验标记组名→点击“修改”。

21.特殊实验标记组组内标记的编辑(1)添加特殊实验标记:点击特殊实验标记选择区编辑框按钮“L”(位于BL-420主界面的右上角、BL-410主界面的右下角)→点击“实验标记列表”中的“新建”→输入文本添加特殊实验标记→点击“确定”。

(2)删除特殊实验标记:点击特殊实验标记选择区编辑框按钮“L”(位于BL-420主界面的右上角、BL-410主界面的右下角)→选中“实验标记列表”中的某一特殊实验标记→点击 “删除”→点击“确定”(3)调整特殊实验标记的顺序:点击特殊实验标记选择区编辑框按钮“L”(位于BL-420主界面的右上角、BL-410主界面的右下角)→选中“实验标记列表”中的某一特殊实验标记→点击 “上移”或“下移”→点击“确定”。

22.左右视分隔条如何使用?将光标放在左右视分隔条上→当光标变成左右箭头状,点击鼠标左键向左或右拖动分隔条23.在数据反演时,如何根据查询条件对原始采样波形进行查找?进行数据反演时左键点击“数据查找菜单”按钮→可以根据时间、通用标记或特殊标记对实验波形进行查找。

24.波形横向压缩和横向扩展两个功能按钮的使用(1)进行数据反演时左键点击“压缩波形”按钮→实验波形在时间轴上压缩(2)进行数据反演时左键点击“扩展波形”按钮→实验波形在时间轴上扩展25.如何结束一个实验并进行原始数据的保存?。

点击工具条上的“停止”按钮→对话框“确实要停止实验吗” →选择“是”→给文件取名→点击“保存”按钮(默认保存在data文件夹)第三节  急性动物实验的基本操作技术实验一、蛙类实验1.演示蛙类动物的捉拿固定。

取蛙或蟾蜍1只,捉拿蛙或蟾蜍时宜用左手将动物背部贴近手掌固定,以中指、环指和小指压住其左腹侧和后肢,拇指和示指分别压住右、左前肢,右手进行操作抓取蟾蜍时,切勿挤压两侧耳部突起的毒腺,以免毒液射入实验者眼中,可先在蟾蜍体部包一层湿布再进行操作。

2.演示蛙类动物脑和脊髓的破坏用左手示指压住其头部前端使头前俯,右手持探针从枕骨大孔垂直刺入,然后向前倾斜刺入颅腔,左右搅动捣毁脑组织,将探针抽出再由枕骨大孔向后刺入脊椎椎管,捣毁脊髓此时如果蛙或蟾蜍的四肢先强直后松软,呼吸消失,表示脑、脊髓已被完全破坏。

3.连接蛙心和传感器剪开蛙或蟾蜍胸部皮肤,以大镊提起胸骨剑突,用剪刀剪开胸骨和左右锁骨并向上翻起,暴露心脏,用眼科剪小心剪开心包膜用带有连线的蛙心夹在心室舒张期夹住心尖,并将蛙心夹的丝线连接于张力传感器。

4.演示如何在生物机能实验系统中开启蛙心搏动实验双击Windows操作系统桌面上的“BL-420/BL-410生物机能实验系统”图标→ “输入信号”菜单→选择通道→设定信号种类“张力”→工具条 “启动波形显示”命令按钮。

实验二、家兔实验1.演示家兔的捉拿捉拿家兔时,右手抓住家兔的项背近后颈部的皮肤,轻轻提起左手托住家兔臀部,使其体重主要落在左手掌心2.演示家兔的耳缘静脉注射家兔一般采用外侧耳缘静脉注射,一人操作时,将兔放入兔盒或实验台上,选好耳缘静脉,拔出局部的毛,用乙醇棉球涂擦,并用食指轻弹耳壳,使血管扩张,用左手的食指和中指夹住耳根部,阻断静脉回流,拇指和环指夹住耳尖部拉直,右手将抽好药液的注射器(6-7号针头)针头刺入血管,用拇指和食指使针头和兔耳固定,将药液推入,如针头在血管内,推注轻松,并可见血液被药液冲走,如不在血管内,则推注有阻力,耳局部变白或肿胀,应立即拔出重新穿刺,如两人合作,一人夹住家兔,右手暴露血管,压住耳根部使血管充盈,另一人注射给药。

3.演示家兔的兔台固定兔台固定方法是先以四条1 cm宽的布带做成活的圈套,前肢系在腕关节以上,后肢系在踝关节以上,前、后肢分别拉直固定于兔台上然后将家兔头部用兔头固定器或用棉线钩住门齿,固定于兔台头端的铁杆。

4.演示家兔的兔盒固定兔盒固定方法是将兔放入木制或铁皮制的兔盒固定器内,仅使头部及双耳伸出兔盒前壁凹形口,关上兔盒顶盖即可5.演示家兔的气管分离气管位于颈部正中位置,颈部气管全部被胸骨舌骨肌和胸骨甲状肌所覆盖。

分开左、右胸骨舌骨肌,在正中线的联合处,用止血钳沿中线插入并向前后两端扩张创口注意止血钳插入不可过深,以免损伤气管和其他小血管也可以采用两食指沿左、右胸骨舌骨肌中缝轻轻向上下拉开,然后将左右胸骨舌骨肌向两侧拉开,即可看到气管。

一般在喉头以下气管分离一段气管,在气管下方穿一条粗线备用6.演示家兔的颈外静脉的分离家兔的颈外静脉比较粗大,是头颈部静脉的主干颈外静脉分布比较表浅,在颈部皮下胸锁乳突肌的外缘打开颈部切口以后,用手指将一侧切开的皮肤自外面向上顶起,就可以看到较粗大的呈暗紫色的颈外静脉。

用钝头止血钳或玻璃分针,沿着静脉走行方向,平行地轻轻将颈外静脉周围的结缔组织分离一般分离颈外静脉的长度为3~4cm,分离完毕后,在静脉下穿两根丝线备用7.演示家兔的颈总动脉的分离颈总动脉位于气管两侧,胸骨舌骨肌和胸骨甲状肌背侧,左右各一条。

分离覆盖于气管上面的胸骨舌骨肌和侧面斜行的胸锁乳突肌,深处可见呈粉红色较粗大的血管,用手触之有搏动感,即为颈总动脉颈总动脉与颈部神经被结缔组织包在一起,小心的分离开结缔组织,即打开颈动脉鞘就可以看到颈总动脉和神经。

为了便于插管和测量血压等操作,颈总动脉分离的应尽量长一些,一般家兔为3~4cm,分离完毕后在颈总动脉下方穿两根丝线备用8.演示家兔的颈部神经的分离颈总动脉与颈部神经被结缔组织包在一起,称颈动脉鞘,打开颈动脉鞘,在颈总动脉周围可见有数条神经伴行,将神经细心分离,减压神经易受损伤,宜先用玻璃分针把其周围的结缔组织分离,然后再分离其它神经。

一般神经分离长度为2~3cm,分离完毕后用细线分别穿好,并各打一虚结备用不同的神经最好用不同颜色的细线,便于识别如实验需要分离两侧神经时,一侧分离好后,用同样的方法在对侧分离9.演示家兔的颈部气管插管术。

气管分离完毕后,在气管中段,两个软骨环之间,用剪刀或手术刀将气管前壁横向切开,再用剪刀向头端作一小纵行切口,使之成为倒“T”型用镊子夹住倒“T”型切口的一角,将适当口径的Y型气管插管自切口向肺脏方向插入气管腔内,再用粗线结扎,然后将结扎线固定于Y型气管插管分叉上,以免气管插管脱出。

10.演示家兔的颈总动脉插管术颈总动脉插管主要用于测量动脉血压或用于放血首先准备插管,取长短适当的塑料管或硅胶管,插入端剪成斜面,插管另一端通过三通活塞与压力换能器相连用盛有稀肝素(20u/m1)、生理盐水的注射器插入三通活塞,将肝素生理盐水充满插管,关闭活塞。

接着将颈总动脉远心端结扎(尽量靠近远心端,而且一定要结扎牢固),然后用动脉夹夹住近心端,使两端的长度尽量长一些用一根准备好的细丝线打一活扣置于动脉夹与远心端结扎线之间用左手小指或食指从血管后轻轻托起血管,右手持眼科剪,在靠近远心端结扎线处,向近心端方向与动脉呈45°夹角剪一“v”形小口(为动脉管径的1/3左右),将动脉插管的尖端斜面与动脉平行地向近心端方向插入动脉内,用细丝线扎紧(插管前应自耳缘静脉注射0.5%肝素溶液0.3-1ml),再用余下的线在插管上打结固定,避免导管脱出。

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